A demanda por produtos naturais está crescendo mundialmente e os fungos representam uma importante fonte de bioativos para o desenvolvimento de fármacos, agentes terapêuticos e de biocontrole. Ophiocordyceps australis (Ascomycota, Hypocreales) é um macrofungo entomopatogênico que parasita formigas (Hymenoptera) e apresenta ampla distribuição geográfica, sendo pouco estudado tanto em uma perspectiva genômica, quanto em prospecção química. Assim, no presente trabalho foi realizado o sequenciamento, montagem e anotação do genoma dessa espécie, visando à predição de genes relacionados com o processo de infecção e patogênese. Além disso, foi realizada uma avaliação do O. australis quanto à produção de extratos brutos em diferentes solventes orgânicos, meios de cultivo e métodos de extrações, assim como testes para verificação de seu potencial antimicrobiano. O genoma sequenciado apresentou extensão de 30.31 Mb, N50 de 92624 pb, conteúdo GC 46.36%, e 8.043 genes codificadores de proteínas. O valor máximo de massa (g) para os extratos do micélio de O. australis cultivado por fermentação submersa, foi verificado no meio de cultura Sabouraud dextrose (SD) pelo método de extração ultrassom (0,3866±0,01). Por outro lado, considerando o cultivo sólido, o meio soja proporcionou maiores valores de massa através do método de maceração combinado com ultrassom (1,5135±0,24). As atividades antibacteriana e antifúngica dos extratos obtidos de O. australis foram avaliadas através dos testes de difusão de discos. Dessa forma, sugere-se que O. australis CCMB661 seja utilizada como agente de biocontrole de insetos, por apresentar genes de virulência e toxicidade para formigas, e que os meios SD e Soja sejam empregados para a produção dos extratos pela técnica de ultrassom.