Os Gymnotiformes (peixes elétricos Neotropicais) são amplamente distribuídos nas Américas Central e do Sul, com maior diversidade e abundância na Bacia Amazônica, sendo uma ordem extremamente diversa. Dentre estes, o gênero Brachyhypopomus (Hypopomidae), atualmente com 28 espécies descritas, possui dados cariotípicos disponíveis para onze delas. Seu número diploide (2n) varia de 36 em B. brevirostris a 44 em fêmeas de B. flavipomus. Já o gênero Archolaemus (Sternopygidae), que compreende um complexo de seis espécies, não possui nenhum dado citogenético publicado até o momento. Visando ampliar estas informações citogenéticas para auxiliar a citotaxonomia e melhor identificação de espécies, bem como investigar os rearranjos cromossômicos responsáveis pela variação cariotípica intragenérica, neste trabalho buscamos estudar o cariótipo de B. brevirostris de duas localidades: Santarém – PA e Reserva Mamirauá, região de Tefé – AM, além de fazermos a primeira descrição cariotípica da espécie Archolaemus janeae sp. nov., analisando indivíduos de duas localidades: Rio Xingu, Altamira – PA e Rio Tocantins, Santarém – PA. Os resultados obtidos até o momento para a espécie Brachyhypopomus brevirostris mostram 2n=38, sendo todos os cromossomos acrocêntricos, com heterocromatina constitutiva evidenciada na região centromérica de todos os cromossomos, além de pequenas bandas heterocromáticas em regiões intersticiais e distais de alguns pares, nas localidades de Tefé - AM e Santarém – PA. A Hibridização in situ Fluorescente com de rDNA 18S marcou a região distal do par cromossômico 19q e a sonda telomérica hibridizou na região distal de todos os cromossomos, sem sinais intersticiais para amostras de Santarém – PA e região de Tefé – AM. Archolaemus janeae mostra 2n igual a 46, sendo composto por 4 cromossomos de dois braços e 42 cromossomos acrocêntricos (2n=46; 4m/sm + 42a), para as localidades de Santarém – PA e Altamira – PA. A heterocromatina constitutiva está evidenciada na região centromérica de todos os cromossomos, além de pequenas bandas heterocromáticas em regiões intersticiais e distais em alguns pares. O rDNA 18S ocorre na região distal do braço curto do par 2, o rDNA 5S ocorre em 5 pares cromossômicos e a sequência snDNA U2 indicou múltipla hibridização. Não foram observadas sequencias teloméricas intersticiais. As populações exibem cariótipos idênticos, confirmando ser uma única espécie. Apresentamos o primeiro dado do marcador U2 para esta família. Estes dados são de grande importância como referência para futuros estudos citotaxonômicos do gênero.