A Segurança dos Alimentos deve estar presente na cultura organizacional de uma empresa, nos seus valores e principalmente nas ações de suas lideranças. Focar nos valores permite perceber e interpretar os fundamentos do comportamento. O objetivo deste trabalho foi desenvolver um método de diagnóstico do nível de cultura do sistema de gestão de qualidade e segurança de alimentos, baseado no comportamento humano em seis unidades de uma empresa do ramo frigorífico, por meio de uma análise quantitativa de dados. Participaram da pesquisa um total de 1.094 funcionários, que foram instruídos a responderem as perguntas de acordo com uma escala de 5 pontos, que variou de “discordo totalmente” a “concordo totalmente”. Com o resultado da pesquisa e utilizando o método desenvolvido foi possível calcular o nível de cultura e o percentual de favorabilidade para cada uma das questões avaliadas. O nível de cultura da empresa foi de 74% e, entre as unidades pesquisadas observou-se diferenças no nível de cultura que variaram de 66% a 87%. Com o cálculo do percentual de favorabilidade identificou-se as maiores oportunidades para elevar o nível de cultura, tais como: apenas 78% de favorabilidade quando questionados se os funcionários seguem as regras de Boas Práticas de Fabricação mesmo quando não estão sendo monitorados. O resultado demonstra a necessidade de se adotar ações para a melhoria contínua visando o comprometimento e engajamento de todos os envolvidos na produção de alimentos de qualidade e seguros à saúde humana.