O Trypanosoma cruzi é um protozoário parasita e agente etiológico da doença de Chagas. Durante seu ciclo biológico o T. cruzi fica exposto a diferentes ambientes com variações na concentração de íons e osmólitos que resultam em diversos eventos de estresse osmótico. Assim, mecanismos de controle do volume celular são importantes para sobrevivência e o sucesso infectivo do parasito. O sistema de regulação osmótica do T. cruzi inclui os acidocalcissomos, organelas acídicas, ricas em íons e polifosfatos; e o complexo do vacúolo contrátil (CVC), estrutura organizada em vesículas e túbulos, responsável pela captação e efluxo da água intracelular. O processo de saída da água acumulada no CVC se dá pela bolsa flagelar por mecanismo ainda não completamente elucidado. Estudos anteriores sugerem a presença de uma placa de adesão entre CVC e bolsa flagelar que atuaria como local de saída da água, porém sua dinâmica de funcionamento e a identidade molecular permanecem desconhecidas. Este trabalho teve por objetivos estudar a ultraestrutura da placa de adesão em T. cruzi, sua dinâmica estrutural e função junto ao CVC durante o ciclo de pulsação e investigar a identidade molecular deste novo domínio. Foram utilizados mutantes epimastigotas superexpressando TcPDEC2 e TcVps34 e o nocaute para TcMscS que apresentam diferentes respostas ao estresse osmótico. Para análises ultraestruturais, as amostras foram processadas por técnicas de congelamento por alta pressão seguido de substituição a frio ou por congelamento por imersão. O material foi visualizado por métodos avançados de microscopia eletrônica tridimensional e criomicroscopia. As análises para investigação molecular do sistema de regulação osmótica e placa de adesão se deram pela marcação endógena e o nocaute por CRISPR/Cas9 dos genes das proteínas candidatas AP180, Disgorgina e Sec6. Os resultados mostram alta dinâmica estrutural da placa de adesão junto ao CVC durante o ciclo de pulsação do vacúolo e a divisão celular. Foram observados pela primeira vez poros de fusão entre o vacúolo central e a bolsa flagelar no domínio da placa de adesão. Também foram encontradas evidências da participação dos canais mecanosensitivos TcMscS no processo de efluxo do CVC. Além disso este trabalho traz evidências da participação das proteínas AP180, Sec6 e Disgorgina no sistema de regulação osmótica, assim como do potencial da criomicroscopia e criotomografia in situ para o estudo morfofuncional do T. cruzi. A placa de adesão revela-se como um novo micro domínio compartilhado entre a bolsa flagelar e o CVC, com participação no mecanismo de efluxo na regulação osmótica e potencial função na biogênese do CVC no T. cruzi.