A resistência apresentada por parte dos patógenos existentes no mundo todo, somada a falta de antimicrobianos inovadores são grandes problemas para a humanidade, principalmente em tempos pós-pandemia. Nesse sentido, a Química Medicinal se destaca como uma área muito importante tendo em vista seu papel no descobrimento e planejamento de novos candidatos a fármacos. Produtos naturais são, há muito tempo, empregados como substâncias de partida na elaboração de derivados potencialmente bioativos, muitas vezes por derivatização com grupos químicos reconhecidamente importantes como farmacóforo. Tendo isso em vista, e levando em conta as pesquisas deste grupo com eugenol e seus análogos, objetivou-se com deste trabalho sintetizar dezesseis derivados piperazínicos do eugenol/dihidroeugenol, caracterizá-los, avaliar sua citotoxicidade e suas atividades antibacteriana, antimicobacteriana e tripanossomicida in vitro. Para a síntese dos derivados, empregou-se essencialmente a reação de Mannich envolvendo eugenol ou dihidroeugenol, formaldeído e um conjunto de diferentes piperazinas. As substâncias planejadas, denominados IRLAE1-IRLAE10 e IRLAD1-IRLAD10 foram obtidas com rendimentos entre 10-84% e tiveram suas identidades comprovadas por métodos de análise estrutural. Das 16 substâncias sintetizadas, 13 são inéditas. Das avaliações biológicas, observou-se que todas elas apresentaram citotoxicidade somente acima de 500 μM e que demonstraram apenas baixa atividade contra o parasita Trypanosoma cruzi (acima de 125 μM). Entretanto, os derivados IRLAE8, IRLAE9, IRLAE10, IRLAD4, IRLAD9 e IRLA10 mostraram atividade antibacteriana e antimicobacteriana expressivas (CIM entre 1,22 e 19,53 μg.mL-1) contra todas as espécies testadas (Mycobacteroides abcessus, Mycobacterium fortuitum, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Klebsiella pneumoniae e Pseudomonas aeruginosa), inclusive contra isolados clínicos resistentes. Ainda, essas seis substâncias mostraram-se ativas contra a formação de biofilmes de espécie em valores de fração da concentração inibitória mínima. Esses achados apontam parte dos produtos como promissores e os destacam como bons protótipos para estudos mais aprofundados na busca de novos antimicrobianos.