• Portal do Governo Brasileiro

Plataforma Sucupira

Dados do Trabalhos de Conclusão

UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS
ENGENHARIA QUÍMICA (33003017034P8)
Educação Presencial
BIOMATERIAIS À BASE DE HIDROGÉIS MICROFLUÍDICOS DESENVOLVIDOS PARA A ENTREGA DE GENES INCORPORADOS EM NANOCARREADORES LIPÍDICOS
BRUNA GREGATTI DE CARVALHO
TESE
22/03/2023

A terapia gênica é realizada com a transferência de ácidos nucléicos in vivo ou ex vivo nas células alvo, sendo um dos seus maiores desafios o desenvolvimento de estratégias capazes de melhorar os baixos níveis de transferência e expressão gênica. O nível de expressão gênica depende principalmente da eficiência da entrega desses materiais no interior das células, que requer a utilização de sistemas específicos de entrega, como os nanovetores virais e não-virais. Neste contexto, a síntese dos microcarreadores e o processo de encapsulação dos nanovetores não-virais foram obtidos via processo microfluídico de gotas, que é uma ferramenta promissora para formação dessas estruturas, sendo possível controlar o seu tamanho, polidispersidade, formato e a estrutura interna e permitirão a liberação sustentada destes sistemas de nanoencapsulação. A microfluídica de gotas foi utilizada como principal técnica para produção de micropartículas e scaffolds para incorporação e liberação de nanovetores não virais. O trabalho foi dividido em três principais etapas de pesquisa. Na primeira etapa, micropartículas híbridas, alginato (ALG) /fibroína de seda (SF) e ALG/sulfato de condroitina (CS), foram sintetizadas em microcanais e caraterizadas com relação as suas propriedades morfológicas e físico-químicas. Os microgéis híbridos demostraram-se promissores como sistema de encapsulação e liberação de nanopartículas com diferentes hidrofobicidades. Na segunda etapa, micropartículas funcionais para entrega localizada de material genético e cultura in vitro foram desenvolvidas via processo microfluídico e aplicação da técnica layer-by-layer. Os microgeis recobertos com poli-lisina (PLL), cloridrato de polialilamina (PAH) e CS foram aplicados para incorporação de vetores não-virais carreados com DNA plasmidial (pDNA) enhanced Green Fluorescent Protein (eGFP). Na ultima etapa foi desenvolvido um scaffold microporoso de gelatina metacrilada (GelMA) para incorporação de vetores não-virais e liberação de RNA mensageiro (mRNA-eGFP). Além do mais, vetores não-virais assim como os lipossomas catiônicos (CL) foram modificados e adaptados a matriz polimérica do microgel. Nessa etapa, as propriedades coloidais e estabilidade dos vetores foram extensivamente estudadas e reportadas. Este projeto teve colaboração com o Centro de Terapia Celular e Molecular (CTCMol) da Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), Instituto de Biologia (IB) da Universidade de Campinas (UNICAMP) e Terasaki Institute for Biomedical Innovation (TIBI) mais especificamente com o grupo de pesquisa coordenado pelo Prof. Dr. Sang Won Han, Prof. Dr. Hernandes Carvalho e Prof. Dr. Ali Khademhosseini, respectivamente. Em geral este trabalho contribui para o desenvolvimento de estratégias inovadoras de incorporação e liberação sustentada de materiais genéticos, atuando nas áreas de microfluídica de gotas, nanobiotecnologia, entrega de genes e engenharia tecidual.

microfluídica;mRNA;pDNA;biopolímeros;entrega de gene;microgel;matriz granular;engenharia tecidual
Gene therapy requires the transfer of genetic materials in vivo or ex vivo into target cells; one of its most significant challenges is the development of strategies able to improve the low levels of gene transfer and expression. The gene expression level depends primarily on the efficiency of the delivery of these materials into cells, which requires specific delivery systems, such as viral and non-viral vectors. In this context, the microcarriers synthesis and the encapsulation process of non-viral vectors were performed by droplet microfluidics, which is a promising tool for the synthesis of such structures, wherein it is possible to control the size, polydispersity, shape, and internal structure, allowing the sustained release of these non-viral vectors. This work was divided into three main research steps. First, hybrid microgels, alginate (ALG)/silk fibroin (SF), and ALG/chondroitin sulfate (CS) were synthesized in microchannels and characterized according to their morphological and physicochemical properties. The hybrid microgels were promising systems for incorporating and releasing cargos with different hydrophobicities. Secondly, functional microgels for localized gene delivery and in vitro cell culture were developed by combining microfluidics and the layer-by-layer (LbL) technique. The layered alginate-based microgel consisting of polylysine (PLL), polyallylamine hydrochloride (PAH), and CS was used to incorporate non-viral vectors loaded with a plasmid (DNA) enhanced Green Fluorescent Protein (eGFP), pDNA-eGFP. In the last step, a gelatin methacryloyl (GelMA) microporous scaffold was developed to incorporate non-viral vectors and messenger mRNA (mRNA-eGFP) release. Also, non-viral vectors such as cationic liposomes (CL) were modified and adapted to the polymeric matrix of microgel. Here, the colloidal properties and stability of non-viral vectors were extensively studied and reported. This thesis was performed in collaboration with the Center for Cellular and Molecular Therapy (CTCMol) of the Federal University of São Paulo (UNIFESP), the Institute of Biology (IB) at the University of Campinas (UNICAMP), and the Terasaki Institute for Biomedical Innovation (TIBI), more specifically with the research group coordinated by Prof. Dr. Sang Won Han, Prof. Dr. Hernandes Carvalho, and Prof. Dr. Ali Khademhosseini. Overall, this project contributes to the development of innovative strategies for incorporating and sustaining release of genetic materials acting in droplet microfluidics, nanobiotechnology, gene delivery, and tissue engineering.
microfluidics;mRNA;pDNA;biopolymers;gene delivery;microgels;granular scaffolds;tissue engineering
1
202
PORTUGUES
UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS
O trabalho possui divulgação autorizada
Inf.PRPG-07-2019.pdf

Contexto

ENGENHARIA QUÍMICA
CIÊNCIA E ENGENHARIA DE BIOPROCESSOS E BIORRECURSOS
MICROFLUÍDICA COMO PLATAFORMA TECNOLÓGICA PARA NANO & BIOTECNOLOGIA

Banca Examinadora

LUCIMARA GAZIOLA DE LA TORRE
DOCENTE - PERMANENTE
Sim
Nome Categoria
ROSIANE LOPES DA CUNHA Participante Externo
MARLUS CHORILLI Participante Externo
LUCIMARA GAZIOLA DE LA TORRE Docente - PERMANENTE
MICAELA TAMARA VITOR Participante Externo
ANGELA MARIA MORAES Docente - PERMANENTE

Financiadores

Financiador - Programa Fomento Número de Meses
CONS NAC DE DESENVOLVIMENTO CIENTIFICO E TECNOLOGICO - Bolsa de Doutorado no País GD 60

Vínculo

-
-
-
Sim
Plataforma Sucupira
Capes UFRN RNP
  • Compatibilidade
  • . . .
  • Versão do sistema: 3.87.7
  • Copyright 2022 Capes. Todos os direitos reservados.

Nós usamos cookies para melhorar sua experiência de navegação no portal. Ao utilizar o gov.br, você concorda com a política de monitoramento de cookies. Para ter mais informações sobre como isso é feito, acesse Política de cookies.Se você concorda, clique em ACEITO.

Politica de Cookies

O que são cookies?

Cookies são arquivos salvos em seu computador, tablet ou telefone quando você visita um site.Usamos os cookies necessários para fazer o site funcionar da melhor forma possível e sempre aprimorar os nossos serviços. Alguns cookies são classificados como necessários e permitem a funcionalidade central, como segurança, gerenciamento de rede e acessibilidade. Estes cookies podem ser coletados e armazenados assim que você inicia sua navegação ou quando usa algum recurso que os requer.

Cookies Primários

Alguns cookies serão colocados em seu dispositivo diretamente pelo nosso site - são conhecidos como cookies primários. Eles são essenciais para você navegar no site e usar seus recursos.
Temporários
Nós utilizamos cookies de sessão. Eles são temporários e expiram quando você fecha o navegador ou quando a sessão termina.
Finalidade
Estabelecer controle de idioma e segurança ao tempo da sessão.

Cookies de Terceiros

Outros cookies são colocados no seu dispositivo não pelo site que você está visitando, mas por terceiros, como, por exemplo, os sistemas analíticos.
Temporários
Nós utilizamos cookies de sessão. Eles são temporários e expiram quando você fecha o navegador ou quando a sessão termina.
Finalidade
Coletam informações sobre como você usa o site, como as páginas que você visitou e os links em que clicou. Nenhuma dessas informações pode ser usada para identificá-lo. Seu único objetivo é possibilitar análises e melhorar as funções do site.

Você pode desabilitá-los alterando as configurações do seu navegador, mas saiba que isso pode afetar o funcionamento do site.

Chrome

Firefox

Microsoft Edge

Internet Explorer