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Plataforma Sucupira

Dados do Trabalhos de Conclusão

INSTITUTO FEDERAL DE EDUCAÇÃO, CIÊNCIA E TECNOLOGIA DE MATO GROSSO
QUIMICA TECNOLÓGICA E AMBIENTAL (50005014002P0)
Educação Presencial
PROPÍDIO MONOAZIDA FOTO ATIVADO EM EQUIPAMENTO DE BAIXO CUSTO PARA INATIVAR DNA LIVRE DE ESPÉCIES BACTERIANAS
ERICO TASSO LEITE BARROS TEIXEIRA
DISSERTAÇÃO
21/06/2024

A tecnologia na produção agroindustrial é crucial para o desenvolvimento social, oferecendo vantagens competitivas e aumento de produção. Ela melhora a segurança alimentar e a gestão da qualidade, prevenindo riscos associados à alimentação. No entanto, há aumento de doenças transmitidas por alimentos devido ao consumo inadequado. A PCR é usada para análises microbiológicas, além de outras dezenas de aplicações, porém detecta também DNA de microrganismos inviáveis e/ou extracelular. Como alternativa, o Propídio Monoazida (PMA) tem sido usado para inibir e remover o DNA de células não viáveis como pré-tratamento antes da PCR em tempo real. No entanto essa foto ativação tem um preço elevado devido ao custo do equipamento específico para foto ativação do PMA. Com objetivo de sanar esse problema foi desenvolvido um equipamento similar, por meio de impressora 3D, que possa ativar o PMA de forma que facilite o acesso, diminuindo seu custo. Foram adquiridas 4 amostras de AMPs folhosos mistos de alface e repolho, divididos em 5 sub amostras, com 4 distintos tratamentos, além de uma amostra controle, que resultaram em 100 análises. O processo de extração do DNA seguiu etapas conforme literatura, e o método escolhido para a quantificação do DNA viável foi através da RT-PCR. A análise de PCR foi realizada para detectar a presença de DNA microbiano usando o primer 16S, com resultados positivos indicados por bandas fluorescentes no gel de agarose. Para a análise estatística, foi realizado teste T, utilizando o Software STATISTICA 10.0. Amostras com primers espécie específicos de Staphylococcus aureus, Salmonella sp., Escherichia coli e Shigella sp. foram testadas, com resultados negativos para os três primeiros e positivo para Shigella sp. As análises subsequentes de RT-PCR evidenciaram resultados positivos com uso do primer 16S rDNA e para Shigella. No entanto, o equipamento não inativou o DNA ou diferenciou as cadeias em células viáveis ou não viáveis, tendo em vista que ambos os tratamentos e controles não se diferenciam estatisticamente. Novos testes com outro protótipo do equipamento e ajustes de intensidade luminosa serão realizados para validar ou refutar nossa hipótese

Shigella sp;luz azul, RT-PCR, Microrganismos
The technology in agroindustrial production is crucial for social development, offering competitive advantages and increased production. It enhances food security and quality management, preventing risks associated with consumption. However, there is an increase in foodborne diseases due to improper consumption. Polymerase Chain Reaction (PCR) is utilized for microbiological analyses, among numerous other applications; however, it also detects DNA from non-viable and/or extracellular microorganisms. As an alternative, Propidium Monoazide (PMA) has been employed to inhibit and remove DNA from non-viable cells as a pretreatment before real-time PCR. Nonetheless, this photoactivation process comes at a high cost due to the specific equipment required for PMA photoactivation. To address this issue, a similar device was developed using 3D printing technology, enabling easier access to PMA activation and reducing its cost. Four samples of mixed leafy greens, comprising lettuce and cabbage, were acquired, divided into five sub-samples, each undergoing four distinct treatments, along with a control sample, resulting in a total of 100 analyses. The DNA extraction process followed established protocols, and quantification of viable DNA was conducted via RT-PCR. PCR analysis was performed to detect the presence of microbial DNA using the 16S primer, with positive results indicated by fluorescent bands on agarose gel. For statistical analysis, a T-test was conducted using STATISTICA 10.0 software. Samples with species-specific primers for Staphylococcus aureus, Salmonella sp., Escherichia coli, and Shigella sp. were tested, yielding negative results for the first three and positive for Shigella sp. Subsequent RT-PCR analyses revealed positive results using the 16S rDNA primer and for the Shigella genus. However, the equipment failed to inactivate DNA or differentiate between viable and non-viable cells, as both treatments and controls did not exhibit statistical differentiation. New tests with another prototype of the equipment and adjustments to light intensity will be conducted to validate or refute our hypothesis.
shigela sp;RT-PCR;blue light;micoorganisms
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PORTUGUES
INSTITUTO FEDERAL DE EDUCAÇÃO, CIÊNCIA E TECNOLOGIA DE MATO GROSSO
O trabalho possui divulgação autorizada
DISSERTACAO_ERICO.pdf

Contexto

Química
QUÍMICA TECNOLÓGICA APLICADA A PROCESSOS INDUSTRIAIS
-

Banca Examinadora

SANDRA MARIOTTO
DOCENTE - PERMANENTE
Sim
Nome Categoria
JANAINA ROSA DE SOUSA Participante Externo
GRASIELLI CORREA DE OLIVEIRA Pós-Doc
SANDRA MARIOTTO Docente - PERMANENTE

Financiadores

Financiador - Programa Fomento Número de Meses
INSTITUTO FEDERAL DE EDUCAÇÃO, CIÊNCIA E TECNOLOGIA DE MATO GROSSO - FINANCIAMENTO INSTITUCIONAL PROPES 12

Vínculo

-
-
-
Sim

Produções Intelectuais Associadas

Nome Tipo da Produção Subtipo da Produção
PROPÍDIO MONOAZIDA FOTOATIVADO EM EQUIPAMENTO DE BAIXO CUSTO PARA INATIVAR DNA LIVRE DE ESPÉCIES BACTERIANAS BIBLIOGRÁFICA ARTIGO EM PERIÓDICO
Plataforma Sucupira
Capes UFRN RNP
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  • Versão do sistema: 3.87.7
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