A família Lauraceae é constituída por 52 gêneros dentre os quais o gênero Ocotea Aubl. se destaca devido ao grande número de espécies de elevada importância econômica. O presente trabalho teve como principal objetivo realizar um estudo bioguiado pelo ensaio in vitro de avaliação da atividade anticolinesterásica a partir de espécies de Ocotea ainda não estudadas e disponíveis no semiárido baiano. Os extratos em diclorometano de O. pomaderroides (EDiOPOm), O percoriacea (EDiOPer), O. spixiana (EDiOS), e Ocotea sp. (EDiOsp) inibiram a atividade acetilcolinesterásica em 71,86; 92,09; 74,45 e 77,74%, respectivamente, no tempo 30 min. Os extratos hexânicos: EHexOPom, EHexOPer e EHexOsp apresentaram atividade anticolinesterásica de 92,18; 83,28 e 86,72%, respectivamente e os extratos em acetato de etila: EAcOPOm e EAcOsp inibiram a ação da acetilcolinesterase em 74,25 e 76,19%. Os extratos EDiOPom e EDiOPer foram fracionados por cromatografia em coluna de sílica gel e as frações obtidas também foram submetidas a avaliação da atividade anticolinesterásica. As frações 4/5 (obtida de EDiOPom), 5/6 (proveniente de EDiOPer) e 10/7 (obtida de 5/6) demonstraram atividade anticolinesterásica de 97,41; 87,23 e 100%, respetivamente, comparável ao padrão eserina que inibiu a atividade da enzima em 94,35%. As frações ativas 4/5, 5/6 e 10/7 possuem, portanto, elevado potencial como produto biotecnológico com potente atividade acetilcolinesterásica. A análise do perfil químico por CLAE-DAD e CLAE-DAD-EM/EM dos extratos mais ativos revelou a presença de flavonoides glicosilados derivados da quercetina e do canferol, além de flavonoides di-cumaroil glicosilados como substâncias majoritárias presentes nas amostras testadas. A partir da fração 5/5 (obtido de EDiOPom) foi possível isolar o sitosterol, identificado por RMN 1H e 13C. Este trabalho descreve pela primeira vez estudos químicos e biológicos realizados com as espécies Ocotea pomaderroides, O. percoriacea e Ocotea spixiana.