No presente trabalho, o fracionamento da fase solúvel em MeOH do extrato hexânico das cascas dos frutos de Porcelia macrocarpa forneceu um grupo (FMEH4-4) composto por treze acetogeninas acetilênicas (1 – 13), sendo 1 – 7 inéditas na literatura. Após isolamento, as acetogeninas foram submetidas a avaliação potencial anti-Trypanosoma cruzi, tanto para formas tripomastigotas quanto para amastigotas intracelulares. Como resultado, as acetogeninas 2, 3, 12 e 13 mostraram atividade in vitro com valores de CE50 de 44,2, 12,0, 6,8 e 52,1 µM, respectivamente, para formas tripomastigotas. Os compostos 12 e 13 também apresentaram valores de CE50 de 10,9 e 9,2 µM frente às formas amastigotas, respectivamente. As demais acetogeninas se mostraram inativas para ambas as formas. Além disso, as acetogeninas 1 – 13 não mostram toxicidade frente a células de mamífero, na maior concentração testada (CC50 > 200 M). Visando a obtenção de novas quantidades das acetogeninas, o extrato metanólico das cascas dos frutos de P. macrocarpa foi submetido a partição líquido/líquido e a fase hexânica se mostrou constituída pelos metabólitos de interesse. Após fracionamento cromatográfico foi obtido o grupo FH3- 4, constituído pelas acetogeninas 8 – 11. O potencial anti-T. cruzi in vitro desse grupo foi avaliado, sendo obtidos valores de CE50 4,9 e 2,4 µg/mL para as formas tripo- e amastigotas, respectivamente. Tendo em vista que os compostos 8 – 11, isoladamente, não mostraram atividade, foi possível sugerir que a mistura presente no grupo FH3-4 atue sinergicamente. Frente a esses resultados, a exploração do mecanismo de ação por ensaios fenotípicos frente à tripomastigotas de T. cruzi do grupo FH3-4 resultou em níveis menores de cálcio intracelular, além de aumento significativo de ATP e dos níveis de ROS. Análise in silico de parâmetros ADMET dos compostos 1 – 13 indicaram alta absorção intestinal e nenhum alerta de PAINS, porém baixa biodisponibilidade. A fim de melhorar tal parâmetro, formulações lipossomais liofilizadas dos compostos 12 e 13, ativos, foram preparados. O screening dos lipossomas frente à amastigotas levou a valores de 68,6 e 38,4% de tratamento dos macrófagos infectados a 0,35 M, sem indício de citotoxicidade. Comparativamente, o controle positivo benznidazol lipossomal levou a 71,2% de tratamento, a 0,40 M. Por outro lado, os compostos 12 e 13 livres forneceram valores de tratamento dos macrófagos muito similares aos observados para as formulações lipossomais (85,0 e 54,0%, respetivamente), porém a 50 M. Além disso, foi realizada um estudo de metabolômica untargeted a fim de avaliar o metaboloma das formas tripomastigotas frente ao tratamento com a agetogenina mais ativa (12). Após processamento e tratamento estatístico, o tratamento com 12 mostrou alterações significativas na concentração de metabólitos relacionados à composição da membrana plasmática e vias de sinalização do parasita. Este estudo demonstra o potencial das frações e compostos identificados como leads para novos protótipos anti-T. cruzi, enquanto também destaca a necessidade de ensaios futuros, incluindo ensaios fenotípicos e maior quantidade amostral para validação dos dados de metabolômica.