O Ae. aegypti é o mosquito responsável pela transmissão de doenças como Dengue, Chikungunya, Zika e febre amarela, enfermidades que afetam milhões de pessoas globalmente, resultando em milhares de mortes. Ao longo dos anos, as larvas do Ae. aegypti têm desenvolvido resistência aos larvicidas atualmente disponíveis, tornando crucial o desenvolvimento de novos agentes para o controle desses insetos. Em vista ao exposto, foi sintetizado o N-tosilindol, um derivado do indol que demonstrou significativa atividade larvicida contra as larvas de Ae. aegypti em estudos recentes. O N-tosilindol foi sintetizado a partir de indol comercial, usando cloreto de tosila (TsCl) e NaOH como base em diclorometano (DCM) e cloreto de benziltrimetilamônio (TEBA), tendo sido obtido um produto final com pureza ≥95%. Devido ao potencial de uso desse composto como larvicida por Secretarias de Saúde e pela população em geral, torna-se imprescindível a avaliação da toxicidade celular e genética desta molécula. Neste contexto, o objetivo deste trabalho foi avaliar o potencial citogenotóxico do N-tosilindol em células humanas com capacidade de metabolização hepática (células HepG2/C3A) e células não metabolizadoras (leucócitos humanos). A citotoxicidade foi investigada pelo teste de coloração com Azul de Tripan em leucócitos, e pelo teste da resazurina nas células de hepatocarcinoma (HepG2/C3A). Os ensaios de genotoxicidade foram feitos através do ensaio cometa e do teste do micronúcleo com bloqueio de citocinese. Em concentrações entre 1 e 200 µg/ml, tanto o Ntosilindol quanto seu controle solubilizante polivinilpirrolidona (PVP) não causaram diminuição na viabilidade celular em ambas as células estudadas. Os testes de genotoxicidade evidenciaram que a substância teste nas concentrações de 10, 20 e 50 µg/ml não provocou aumento significativo de danos ao DNA nos dois tipos celulares. O teste do micronúcleo também evidenciou que não houve ocorrência de mutações cromossômicas nas células estudadas, tanto do larvicida, como de seu respectivo controle solubilizante. Considerando que a concentração do larvicida a qual pretende-se utilizar nas caixas d’agua é de cerca 24,4 µg/ml, os dados obtidos nas condições experimentais aplicadas no presente trabalho revelaram que o novo agente larvicida não apresenta efeitos citotóxicos ou genotóxicos em células humanas em cultura.