As actinobactérias são bactérias Gram-positivas com crescimento filamentoso, de grande interesse industrial, devido à sua capacidade de produzir diferentes antibióticos e várias enzimas capazes de hidrolisar substratos contendo celulose, hemicelulose e lignina. Os processos biotecnológicos têm conquistado um lugar de destaque no desenvolvimento tecnológico mundial, exibindo características econômicas e operacionais que conferem vantagens em relação aos processos químicos convencionais. O uso desses processos possibilita a produção enzimas, as quais podem ser obtidas a partir do aproveitamento de resíduos agroindustriais. Diante desse panorama, o presente trabalho teve por objetivo selecionar actinobactérias, produtoras de enzimas e avaliar seu potencial biotecnológico. Um total de 300 isolados de actinobactérias foi testado quanto à capacidade de produzir celulases, xilanases e lacase, utilizando carboximetilcelulose, xilana beechwood e RBBR como substratos. Sete isolados foram selecionados, identificados através de seqenciamento da região 16S do RNA ribossomal e submetidos à seleção quantitativa em fermentação submersa, utilizando diferentes resíduos agroindustriais. Quatro estirpes foram submetidas a uma nova fermentação utilizando farelo de trigo e cevada, como fontes de carbono e suplementadas com diferentes fontes de nitrogênio (peptona, extrato de levedura e milhocina). A estirpe promissora Streptomyces chartreusis MC-55 foi cultivada em Fsm, utilizando as fontes de carbono (farelo de trigo e cevada) combinadas com concentrações variadas das fontes de nitrogênio (peptona e extrato de levedura), através do delineamento composto central rotacional. As maiores produções de xilanase (66,50 U.mL-1 e 59,22 U.mL-1) foram observadas quando 4,0% de farelo de trigo e 0,8% de peptona foram utilizados, bem como 3,5% de cevada e 1,3% de peptona, no sexto dia de cultivo. Após a validação, a atividade dos extratos foi caracterizada bioquimicamente. A temperatura e pH considerados ótimos foram 60ºC e 6,0, respectivamente, para ambos os extratos, permanecendo estáveis até 50 °C, em uma faixa de pH 4,0 a 7,0, após 1 h de incubação. Todos os íons testados (Na+, Zn+2, Mn+2, Mg+2, Ca+2, Cu+2, Fe+2, K+, Hg+2, Co+2, Sr+2 e EDTA) na concentração de 1 mM, atuaram como co-fatores na atividade enzimática do extrato obtido a partir do farelo de trigo, enquanto na concentração de 10 mM, apenas os Sr+2 e Co+2, aumentaram a atividade. Quando o extrato foi obtido da cevada, nenhum dos íons testados, nas diferentes concentrações, aumentaram a atividade da enzima. A análise do zimograma revelou a presença de xilanase com peso molecular de 40 KDa para ambos os extratos. Assim, os resultados preliminares deste trabalho indicam que os extratos obtidos da cepa Streptomyces chartreusis MC-55, selecionados após otimização da produção de xilanases, bem como os substratos empregados tem elevado potencial para produção de xilanases e futuras aplicações biotecnológicas.