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Dados do Trabalhos de Conclusão

UNIVERSIDADE ESTADUAL DE FEIRA DE SANTANA
BIOTECNOLOGIA (28002016006P3)
Educação Presencial
Aspectos evolutivos e estruturais da nodulação em espécies herbáceas de Chamaecrista (Moench)
JOSE MIGUEL FERREIRA DOS SANTOS
TESE
29/09/2016

O gênero Chamaecrista é um diverso com mais de 330 espécies de leguminosas, 256 das quais ocorrendo no Brasil. Neste estudo analisamos a nodulação e os rizóbios simbiontes de Chamaecrista spp. ocorrentes em várias fitofisionomias do estado da Bahia, com a seleção de estirpe eficiente. A filogenia dos isolados foi estudada utilizando os marcadores moleculares 16S rRNA, nifH, nodC, ITS e genes housekeeping (recA, atpD, glnII e dnaK). A morfoanatomia e ultra-estrutura do nódulo também foram examinados, bem como a capacidade desses isolados de formar nódulos em C. desvauxii e siratro em tubo de ensaio, sendo a eficiência das estirpes avaliada em C. desvauxii em casa de vegetação. A análise do gene 16S rRNA demonstrou que os isolados pertencem a sete agrupamentos dentro do gênero Bradyrhizobium. A análise do ITS e dos genes housekeeping concatenados agruparam os rizóbios de Chamaecrista por tipo de vegetação e espécies de plantas indicando algumas espécies novas de Bradyrhizobium, também corroborados pelas análises dos genes nodC e nifH. Todas as 47 estirpes testadas produziram nódulos em C. desvauxii, mas nenhuma produziu em siratro. Os nódulos de Chamaecrista são do tipo indeterminado com a zona de fixação de nitrogênio contendo células infectadas e intersticiais, típica da maioria dos nódulos de leguminosas. Das 10 estirpes selecionadas de Bradyrhizobium provenientes de C. ensiformis (seção Apoucouita), C. pascuorum, C. serpens, C. flexuosa, C. rotundifolia (seção Chamaecrista), BRUESC978 que foi isolada de nódulos de C. desvauxii (seção Xerocalyx), foi a mais eficiente na fixação de N conforme produção de biomassa da planta e do teor de N da parte aérea, sendo um potencial bioinoculante. C. desvauxii pode ser usada como planta modelo para testes de estirpes de Bradyrhizobium com genes nodC diversos, devido ao comportamento promíscuo observado nesta viii espécie vegetal. Este trabalho inédito identificou os rizóbios simbiontes de várias espécies de Chamaecrista herbáceas e verificou a diversidade genética dessas bactérias, sugerindo a ocorrência de novas espécies e simbiovares de Bradyrhizobium.

Chamaecrista desvauxii;Bradyrhizobium;conteúdo de nitrogênio;Nodulação;Filogenia;genes Housekeeping;Ultraestrutura
Chamaecrista genus is a highly diverse group with more than 330 legume species, 256 spp. occurring in Brazil. In this study we analyze nodulation and effectiveness of Chamaecrista spp. rhizobia, selecting efficient strains and assessing the diversity of rhizobia isolated from root nodules. Phylogeny of the isolates were performed using molecular markers 16S rRNA, nifH, nodC, ITS and housekeeping genes (recA, atpD, glnII, and dnaK). Nodule morphology, anatomy and ultrastructure were also examined as well as the capacity of those isolates to form nodules on C. desvauxii and siratro plants in silica and effectiveness of nodulation in C. desvauxii in a greenhouse experiment. Analysis of the 16S rRNA gene demonstrated that the isolates belong to seven clusters within Bradyrhizobium genus. ITS region and concatenated housekeeping genes analysis grouped Chamaecrista rhizobia by vegetation type and plant species indicating some novel Bradyrhizobium species, also corroborated by nodC and nifH gene sequences analysis. All 47 strains tested produced effective nodules on C. desvauxii but none in siratro. Chamaecrista nodules are indeterminate with infection threads in meristematic zone, and nitrogen fixation zone with infected and interstitial cells typical for most nodules of legume plants. A pot experiment was carried out with 10 different Bradyrhizobium strains isolated from C. ensiformis (sect. Apoucouita), C. desvauxii (sect. Xerocalyx), C. pascuorum, C. serpens, C. flexuosa, C. rotundifolia (sect. Chamaecrista) and one unidentified Chamaecrista species of herbaceous Chamaecrista, from which strain BRUESC978 isolated from C. desvauxii wild nodule was most efficient based on plant biomass production and N content of shoot, and is a potential strain for inoculants production. C. desvauxii can be used as plant model for testing Bradyrhizobium strains with diverse nodC genes due promiscuous behavior of this x plant species. This unprecedented study identify the symbionts rhizobia on several herbaceous Chamaecrista verifying the genetic diversity of these bacteria suggesting novel Bradyrhizobium symbiovars and species.
Chamaecrista desvauxii;Bradyrhizobium;nitrogen content;Nodulation;Phylogeny;Housekeeping genes;Ultrastructure
01
84
PORTUGUES
UNIVERSIDADE ESTADUAL DE FEIRA DE SANTANA
O trabalho não possui divulgação autorizada

Contexto

BIOTECNOLOGIA COM ÊNFASE EM RECURSOS NATURAIS DA REGIÃO NE
CARACTERIZAÇÃO, CONSERVAÇÃO E MANEJO SUSTENTÁVEL DE RECURSOS BIOLÓGICOS COM POTENCIAL BIOTECNOLÓGICO
Diversidade genética de plantas, animais e microrganismos com potencial biotecnológico

Banca Examinadora

EDUARDO GROSS
DOCENTE - PERMANENTE
Sim
Nome Categoria
CARLA DA SILVA SOUSA Participante Externo
FABIO BUENO DOS REIS JUNIOR Participante Externo
VALERIA FERREIRA FERNANDES Participante Externo
RACHEL PASSOS REZENDE Participante Externo

Financiadores

Financiador - Programa Fomento Número de Meses
FUND COORD DE APERFEICOAMENTO DE PESSOAL DE NIVEL SUP - Programa de Demanda Social 47

Vínculo

Colaborador
Outros
Outros
Sim
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