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Dados do Trabalhos de Conclusão

UNIVERSIDADE ESTADUAL DE FEIRA DE SANTANA
BIOTECNOLOGIA (28002016006P3)
Educação Presencial
Atividade hipocolesterolemiante e anticoagulante de exopolissacarídeos produzidos por Candida boidinii e Trichosporonoides sp
ANTONIO ANDERSON FREITAS PINHEIRO
TESE
24/03/2017

Exopolissacarídeos (EPS) fungícos exercem atividades anticoagulante e hipocolesterolemiante. A Hipercolesterolemia e a trombofilia são responsáveis pelo desenvolvimento de doenças cardiovasculares, incluindo a aterosclerose, o infarto do miocárdio e o acidente vascular encefálico. Foram realizados cultivos submersos para a produção de EPS por Candida boidinii e Trichosporonoides sp. EPS são polímeros fungícos com atividades farmacológicas diversas. O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade hipocolesterolemiante e anticoagulante de exopolissacarídeos produzidos por Candida boidinii e Trichosporonoides sp. O Capítulo 1 descreve a caracterização química e a atividade biológica de EPS produzidos por Candida boidinii. Ensaios de espectroscopia FT-IR dos EPS de Candida boidinii revelaram os tipos de ligações e os grupos funcionais característicos dos beta-glucanos. O tempo de coagulação no ensaio TTPA dos EPS de Candida boidinii na concentração de 2,5 μg / mL de plasma foi 6,0 vezes superior (161,5 ± 0,85 s) ao tempo obtido no controle negativo (26,9 ± 0,52 s), revelando uma importante ação anticoagulante in vitro, que é evidenciada também pela inibição total da coagulação em baixas concentrações da amostra. A concentração de 10% de EPS de Candida boidinii quando coadministrada com dieta hipercolesterolêmica em ratos, apresentou efeito redutor de colesterol plasmático (17,07%) e hepático (69,52%), além do aumento da excreção de colesterol através das fezes. Estes achados evidenciam que a inibição da absorção de colesterol pode ser um dos principais contribuintes para a acão hipocolesterolemiante exercida pelos EPS de Candida boidinii. O capítulo 2 descreve a caracterização química e a atividade biológica dos EPSs produzidos por Trichosporonoides sp. A análise por CLAE obtida após hidrólise de dos EPS de Trichosporonoides sp, caracterizou glucose e manose como os monômeros que compõem este polissacarídeo. Os resultados da atividade anticoagulante dos EPS de Trichosporonoides sp revelaram tempo de prolongamento da coagulação dose-dependente nos ensaios TTPA e TP, evidenciaram também, inibição potente de coagulação neste ensaio, com tempo prolongado de 202,3 ± 0,48s a uma concentração de 5 μg / mL, 7 vezes superior ao controle negativo (26,9 ± 0,52). Observou-se também uma redução nos níveis séricos de CT e não-HDL-c (VLDL-c + LDL-c) em ratos alimentados com dieta rica em gordura (reduçao de 34% no CT e 56,33% no não-HDL-c). Os resultados revelaram também uma diminuição significativa do Índice Aterogênico quando EPS de Trichosporonoides sp foram co-administrados no modelo animal de rato hipercolesterolêmico. A anlálise estatística dos dados foi realizada através da análise de variância (ANOVA) seguida pelo teste de Duncan, sendo significante p<0,05. Os EPS produzidos por Candida boidinii e Trichosporonoides sp configugram-se como candidatos promissores para o desenvolvimento de novos anticoagulantes e agentes hipolipidêmicos. Trombofilia, níveis plasmáticos elevados de LDL-c, CT, TG e baixo nível de HDL-c, estão fortemente associados ao aumento do risco de doenças cardiovasculares. Os resultados obtidos com este trabalho, concluíram que os EPS fúngicos com ações hipocolesterolemiante e anticoagulante apresentam aplicações potenciais em biotecnologia para intervenções direcionadas ao tratamento de doenças cardiovasculares. Entretanto, a análise estrutural e os mecanismos moleculares responsáveis pelas atividades farmacológicas encontradas ainda precisam ser elucidados.

Exopolissacarídeos;Candida boidinii;Trichosporonoides SP;Hipocolesterolemiante. Anticoagulante “in vitro”
Fungal exopolysaccharides (EPS) promotes anticoagulant and cholesterol-lowering activity. Hypercholesterolemia and thrombophilia are known risk factors for developing cardiovascular diseases, including atherosclerosis, myocardial infarction and stroke. Submerged culture conditions for EPS production by Candida boidinii and Trichosporonoides sp was performed. EPS are fungi polymers with varied pharmacological activities. The aim of this study was to evaluate the cholesterol lowering and anti-coagulant activity of exopolysaccharides (EPS) produced by Candida boidinii and Trichosporonoides sp. Chapter 1 describe the chemical and the biological activity of EPS produced by Candida boidinii. FT-IR spectroscopy studies of Candida boidinii EPS showed the type of linkages and the functional groups of the beta-glucans. The APTT clotting times of Candida boidinii EPS at 2.5 µg/mL of plasma was 6.0 times higher (161.5 ± 0.85 s) than that of the negative control (26.9± 0.52 s) with an importantance in vitro anticoagulation action, evidenced by totally inhibit (incoagulable result) at low concentrations. A concentration of 10% purified EPS when co-administered with hypercholesterolemic diet in rats, had a cholesterol-lowering effect in serum (17.07%), and liver (69.52%) and increased of cholesterol excretion through the feces. This evidences supporting that the inhibition of cholesterol absorption might be one of the major contributors to cholesterol-lowering action exerted by Candida boidinii EPS. Chapter 2 describes the chemical characterization and biological activity of EPSs produced by Trichosporonoides sp. HPLC analysis obtained after hydrolysis of Trichosporonoides sp EPS characterized glucose and mannose as polysaccharides monomers. The results of anticoagulant activity of Trichosporonoides sp EPSs revealed dose-dependent prolongation time of APTT and PT coagulation and showed potent inhibition of coagulation with prolonged APTT beyond 202.3 ± 0.48s at concentration of 5 µg/mL, 7-fold more than the negative control required to coagulation (26.9± 0.52). Showed also reduction in the serum levels of TC and non-HDL-c (VLDL-c+LDL-c) values in rats fed high-fat diet (34% decrease in TC and 56.33% in non-HDL-c). It was observed a significant decreased in Atherogenic Index by co-administered Trichosporonoides sp EPSs in hypercholesterolemic rat model. Statistical analysis of the data was performed through analysis of variance (ANOVA) followed by the test Duncan’s, being significant p <0.05. EPSs of Candida boidinii and Trichosporonoides sp represent promising candidates for the development of new anticoagulants and lipid-lowers agents. Thrombophilia, elevated levels LDL-c, TC and TG and low level of HDL-c in serum, also are strongly associated with increased risk of coronary heart disease. The results obtained by this work, it was concluded that fungal EPS with lipid lowering and anticoagulant actions present potential applications in biotechnology for directed interventions in the treatment of cardiovascular diseases. However, the structural analysis and molecular mechanisms accountable for the pharmacology activity remain to be elucidated.
Exopolysaccharides;Candida boidinii;Trichosporonoides sp;Hypocholesterolemic;anticoagulant "in vitro"
01
117
PORTUGUES
UNIVERSIDADE ESTADUAL DE FEIRA DE SANTANA
O trabalho não possui divulgação autorizada

Contexto

BIOTECNOLOGIA COM ÊNFASE EM RECURSOS NATURAIS DA REGIÃO NE
ANÁLISE ESTRUTURAL E FUNCIONAL DE MACROMOLÉCULAS DE MICRORGANISMOS, ANIMAIS E PLANTAS COM POTENCIAL BIOTECNOLÓGICO
-

Banca Examinadora

SANDRA APARECIDA DE ASSIS RODOWANSKI
DOCENTE - PERMANENTE
Sim
Nome Categoria
SIMONE GARCIA MACAMBIRA Participante Externo
MARCIA LUCIANA CAZETTA Participante Externo
ELISA TESHIMA Participante Externo
TALITA LOPES HONORATO Participante Externo

Financiadores

Financiador - Programa Fomento Número de Meses
FUND COORD DE APERFEICOAMENTO DE PESSOAL DE NIVEL SUP - Programa de Demanda Social 31

Vínculo

CLT
Empresa Privada
Ensino e Pesquisa
Sim
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