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Dados do Trabalhos de Conclusão

UNIVERSIDADE ESTADUAL DE FEIRA DE SANTANA
BIOTECNOLOGIA (28002016006P3)
Educação Presencial
Caracterização molecular do CDNA parcial de uma lignina peroxidase e genômica funcional e estrutural de Trametes villosa (SW.) Kreisel, um basidiomiceto de degradação branca do semiárido brasileiro
DALILA DE SOUZA SANTOS FERREIRA
TESE
26/03/2018

Trametes villosa é uma espécie de fungo promissora na despolimerização de compostos ligninocelulósicos por ser um bom produtor das enzimas LiP, Lac e MnP. Até o momento, nenhum registro das sequências desses genes está disponível, o que requer uma investigação detalhada. Primeiramente, foram utilizadas técnicas de DNA recombinante para caracterização molecular da sequência do cDNA de LiP. Em seguida, o genoma do fungo foi sequenciado, montado e anotado para obter informações estruturais e funcionais dos seus genes. Por fim, realizou-se uma anotação funcional na busca por sequências de proteínas do tipo peroxidase de Classe II e modelos 3D das sequências encontradas foram construídos por modelagem comparativa. Nos experimentos de DNA recombinante, apenas um fragmento parcial do cDNA de LiP foi obtido e relacionado a uma proteína hipotética de Trametes versicolor envolvida no processo de degradação de lignina, cuja estrutura secundária é constituída por folhas beta, diferente da formação típica de alfa hélices presentes nas enzimas do tipo peroxidase. Após o sequenciamento de T. villosa, a montagem do genoma apresentou um tamanho de 57,98 Mb com L50 de 691. Um total de 16.711 genes foram preditos, incluindo 590 genes de enzimas CAZy, diretamente envolvidas na decomposição de materiais lignocelulósicos. Após a anotação funcional, foi demonstrada a presença de duas LiPs e três MnPs putativas e suas funções como peroxidases de Classe II foram evidenciadas, com base na qualidade da sequência primária e na estrutura 3D gerada, com perspectiva de indicação para produção recombinante. A partir do genoma de T. villosa, um leque de estudos pode ser elucidado para a compreensão da biologia desse organismo, como rotas metabólicas envolvidas na degradação de lignina e atividade catalítica das suas enzimas ligninolíticas, com grandes perspectivas de aplicação em processos biotecnológicos.

Anotação funcional;Biotecnologia;cDNA;Enzimas ligninolíticas;Genoma Draft;Modelagem comparativa
Trametes villosa is a promising species in lignocellulosic compounds depolymerization for being good producer of LiP, Lac and MnP enzymes. Until now, no records of its enzyme sequences are available, requiring detailed investigation. First, recombinant DNA techniques were used to obtain LiP cDNA sequence. Second, genome of this fungus was sequenced, assembled and annotated to get information on its structural and functional genes. Third, functional annotation was performed to search for protein sequences of Class II peroxidases and a comparative modelling of the found enzymes was applied. In recombinant DNA experiments, only a partial fragment of LiP cDNA was obtained and related to a hypothetical protein of Trametes versicolor involved in lignin degradation, whose secondary structure is composed of beta sheets, different from typical alpha helices of peroxidase type enzymes. After T. villosa sequencing, genome assembly presented 57.98 Mb size with an L50 of 691. A total of 16,711 putative protein-encoding genes were predicted, including 590 genes encoding CAZy enzymes, directly involved in the decomposition of lignocellulosic materials. After functional annotation, the presence of two putative LiP and three putative MnP was demonstrated and their functions as Class II peroxidases were evidenced, based on the quality of primary structure and 3D structure generated, with prospects for recombinant production. From T. villosa genome, a range of studies can be elucidated to understand the biology of this organism, such as metabolic pathways involved in lignin degradation and catalytic activity of its ligninolytic enzymes, with great application perspectives in biotechnological processes.
Biotechnological processes;cDNA;Draft genome;Functional annotation;Ligninolitic enzymes;Molecular Modeling
01
65
PORTUGUES
UNIVERSIDADE ESTADUAL DE FEIRA DE SANTANA
O trabalho não possui divulgação autorizada

Contexto

BIOTECNOLOGIA COM ÊNFASE EM RECURSOS NATURAIS DA REGIÃO NE
ANÁLISE ESTRUTURAL E FUNCIONAL DE MACROMOLÉCULAS DE MICRORGANISMOS, ANIMAIS E PLANTAS COM POTENCIAL BIOTECNOLÓGICO
Caracterização estrutural e funcional de genes e proteínas de microrganismos, animais e plantas com potencial biotecnológico

Banca Examinadora

ARISTOTELES GOES NETO
DOCENTE - PERMANENTE
Sim
Nome Categoria
EDDY JOSE FRANCISCO DE OLIVEIRA Participante Externo
PAMELA DEL CARMEN MANCHA AGRESTI Participante Externo
BRUNO SILVA ANDRADE Docente - PERMANENTE
ANNE CYBELLE PINTO GOMIDE Participante Externo

Financiadores

Financiador - Programa Fomento Número de Meses
FUND COORD DE APERFEICOAMENTO DE PESSOAL DE NIVEL SUP - Programa de Demanda Social 43

Vínculo

CLT
Empresa Privada
Profissional Autônomo
Sim
Plataforma Sucupira
Capes UFRN RNP
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