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Dados do Trabalhos de Conclusão

UNIVERSIDADE ESTADUAL DE FEIRA DE SANTANA
BIOTECNOLOGIA (28002016006P3)
Caracterização bioquímica de potenciais inibidores da enzima superóxido dismutase de Leishmania braziliensis
CAMILA CARANE BITENCOURT BRITO
TESE
16/04/2018

As doenças tropicais negligenciadas (DTNs) apresentam alta morbidade e mortalidade. A leishmaniose apresenta o segundo lugar em mortalidade e encontra-se na terceira posição (após malária e esquistossomose) entre as DTNs com maior DALYS (números de anos de vida perdidos por incapacidade). Dentre as espécies que causam a leishmaniose, Leishmania braziliensis destaca-se no Brasil devido a sua ampla distribuição. No entanto, as opções terapêuticas disponíveis apresentam inúmeros efeitos adversos e surgimento de cepas resistentes. Diante desse quadro, existe uma grande necessidade de novas opções terapêuticas para combater a doença. Assim, as enzimas envolvidas na via antioxidante são consideradas alvo terapêutico para o estudo de compostos contra a leishmaniose. A superoxido dismutase está presente na via antioxidante do parasita (FeSOD) e a validação genética e quimica dessa enzima demonstra sua importancia na sobrevida de Leishmania spp. Além de ser significativamente diferente da enzima presente no hospedeiro (CuZnSOD) sugerindo a possibilidade de identificação de compostos mais seletivos. Assim, o presente trabalho consistiu na obtenção de LbSOD através da clonagem, expressão, purificação e avaliação cinética da enzima. Além disso, a avaliação de derivados tiazolicos e de pirazinas foi realizada através de ensaios de deslocamento térmico e fluorimetricos com proteina marcada covalentemente. O composto Ju-480 foi identificado com afinidade micromolar e sua assinatura termodinamica demonstrou uma contribuição entalpica favorável e uma pequena entropia positiva para afinidade. Entre os derivados de pirazinas, destacaram-se os ligantes CTN1359 e CTN1367 com IC50 na ordem de 10-6M. Contudo, mais estudos serão necessários para otimização desses compostos e melhoria na afinidade por LbSOD.

Fluoresceína;Thermofluor®;Superóxido dismutase;Leishmania braziliensis;Tiazol;Pirazinas
Neglected Tropical Diseases (NTDs) present high morbidity and mortality. Leishmaniasis is the second place in mortality and is in the third position (after malaria and schistosomiasis) among the NTDs with the highest DALYS (Disability-adjusted-life-years lost). Among the species that cause leishmaniasis, Leishmania braziliensis stands out in Brazil due to its wide distribution. However, the available therapeutic options have numerous adverse effects and emergence of resistant strains. Therefore, there is a great need for the development of new therapeutic options to combat the disease. Thus, the enzymes involved in the antioxidant system are considered therapeutic targets for the study of compounds against leishmaniasis. Superoxide dismutase is present in the parasite's antioxidant system (FeSOD) and the genetic and chemical validation of this enzyme demonstrates its importance in the survival of Leishmania spp. In addition, FeSOD is significantly different from the enzyme present in the host (CuZnSOD) suggesting the possibility of identification of more selective compounds. Thus, the present work consisted in obtaining LbSOD through the cloning, expression, purification and kinetic evaluation of this enzyme. In addition, the evaluation of thiazole derivatives and pyrazines was performed by thermal shift assays and fluorimetric with covalently labeled protein. Compound Ju-480 was identified with micromolar affinity and its thermodynamic signature demonstrated a favorable enthalpic contribution and positive entropy for affinity. Among the pyrazine derivatives, the ligands CTN1359 and CTN1367 with IC50 ≈10-6M were identified. However, further studies will be needed to optimize these compounds and improve affinity for LbSOD.
Fluorescein;Thermofluor®;Superoxide dismutase;Leishmania braziliensis;Thiazole;Pyrazines
01
102
PORTUGUES
UNIVERSIDADE ESTADUAL DE FEIRA DE SANTANA
O trabalho não possui divulgação autorizada

Contexto

BIOTECNOLOGIA COM ÊNFASE EM RECURSOS NATURAIS DA REGIÃO NE
ANÁLISE ESTRUTURAL E FUNCIONAL DE MACROMOLÉCULAS DE MICRORGANISMOS, ANIMAIS E PLANTAS COM POTENCIAL BIOTECNOLÓGICO
Caracterização estrutural e funcional de genes e proteínas de microrganismos, animais e plantas com potencial biotecnológico

Banca Examinadora

MARCELO SANTOS CASTILHO
DOCENTE - PERMANENTE
Sim
Nome Categoria
CARLOS GUSTAVO REGIS DA SILVA Participante Externo
RAMON DOS SANTOS EL BACHA Participante Externo
RAQUEL GUIMARAES BENEVIDES Docente - PERMANENTE
JOSE FERNANDO RUGGIERO BACHEGA Participante Externo

Vínculo

Servidor Público
Instituição de Ensino e Pesquisa
Ensino e Pesquisa
Sim
Plataforma Sucupira
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