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Dados do Trabalhos de Conclusão

UNIVERSIDADE ESTADUAL DE FEIRA DE SANTANA
BIOTECNOLOGIA (28002016006P3)
DESENVOLVIMENTO DE BLENDAS POLIMÉRICAS CONTENDO BROMELINA CARREADA EM NANOPARTÍCULAS E LIPOSSOMAS
INGARA KEISLE SAO PAULO BARRETTO MIRANDA
TESE
24/09/2018

A cicatrização de feridas é um processo complexo que envolve múltiplas etapas, sequencias e sobrepostas, sendo fundamental o fornecimento de um ambiente favorável, para favorecer o processo fisiológico. Tendo em vista que filmes poliméricos são capazes de proteger a ferida, melhorar o microambiente, favorecendo, dessa forma, a cicatrização, o objetivo deste trabalho foi produzir filmes poliméricos contendo bromelina em nanocarreadores (nanopartículas e lipossomas), caracterizar os produtos obtidos e avaliar a sua atividade cicatrizante em feridas cirúrgicas, induzidas em ratos. A bromelina foi extraída da polpa de um abacaxi, produto da hibridização entre o Ananas comosus var. erectifolius e o Ananas comosus var. bracteatus. As nanopartículas (NPs) foram produzidas pelo método de nanoprecipitação, e os lipossomas, pelo método de hidratação do filme lipídico seguido de sonicação. A bromelina foi incorporada por meio de adsorção às NPs e no núcleo aquoso dos lipossomas. Foram produzidos diferentes filmes, tendo bromelina livre, bromelina carreada em nanopartículas e em lipossomas, além do controle, sem a protease. Os filmes foram submetidos à análise do potencial cicatrizante em ratos machos da linhagem Wistar, tendo sido induzida uma ferida cutânea através da excisão da pele até a exposição da fáscia muscular, e, seguidamente, coberta com os filmes. As nanopartículas (NPs) sem bromelina apresentaram 387 nm de diâmetro, e, após a adsorção, 496 nm, tendo tamanho semelhante ao encontrado por outros autores, embora, o seu tamanho varie com a concentração utilizada de polímero. A eficiência de associação foi de 45,24%, com manutenção da atividade catalítica. Já foi relatado uma maior eficiência de incorporação, no entanto, a bromelina foi incorporada por meio de encapsulação. O potencial zeta variou de -19 para -5,5 mV, o que resulta em redução da sua estabilidade e propensão à agregação das nanoestruturas durante o armazenamento. A atividade enzimática não variou muito frente às variações de pH e de temperatura, quando incorporada nas NPs. Os lipossomas foram mais eficientes na incorporação da bromelina, tendo uma eficiência de encapsulação de 71.5 ± 0.91%, maior também do que a encapsulação alcançada por outros autores. O tamanho das nanovesículas variou de 243,2 para 298,6 nm, após a incorporação, e, o potencial zeta aumentou, em módulo, variando de -29,4 para -36,8 mV, indicando uma maior estabilidade à agregação, após a incorporação. O estudo histopatológico das lesões permitiu verificar a redução do edema no 14º dia nos animais tratados com membranas contendo bromelina em NPs e em lipossomas, e ausência de polimorfonucleares no tratamento com membranas contendo bromelina em NPs, e, menor intensidade do infiltrado celular e ausência de neovascularização no tratamento com membranas contendo bromelina em lipossomas. O estudo demonstrou a incorporação da bromelina em nanocarreadores e sua aplicação em blendas poliméricas, com manutenção da atividade enzimática e potencial cicatrizante dos produtos obtidos.

Filmes curativos;Nanocarreadores;Cicatrização de ferimentos;Liberação modificada de fármacos;Enzimas proteolíticas
Wound healing is a process with sequential and overlapping phases. A favorable environment is fundamental to promote the physiological process. It is known that polymeric films are able to protect a wound, improving the microenvironment, favoring the healing. Therefore, the present work aimed to produce polymeric films with nanocarried bromelain (nanoparticles and liposomes), to characterize them, and to avaliate its cicatrizant potential on curgical wounds induced in rats. Bromelain was extracted from the pulp of a hybrid pineapple (Ananas comosus var. erectifolius x Ananas comosus var. bracteatus). The nanoparticles (NPs) were produced by the nanoprecipitation method. The liposomes were obtained by the thin lipid hydration method, followed by sonication. The bromelain was adsorbed on NPs and incorpored into liposomes aqueous nucleus. Different films were produced, containing free bromelain, NPs-bromelain, liposomes-bromelain, and the control, without protease. They wound healing potential were studied in male rats of the Wistar line, and a cutaneous wound was induced through excision of the skin, until to muscle exposure. The wounds were covered with films. The NPs presented 387 nm in diameter, and 496 nm after bromelain adsorption, having similar size that found by other authors, though, their size varies with the contribution of polymer. The association efficiency was 45.24%, with maintenance of the catalytic activity. Greater incorporation efficiency has been reported, however, the bromelain has been incorporated into NPs. The zeta potential ranged from -19 to -5.5 mV, resulting in reduction of its stability and propensity to aggregate the nanostructures during storage. The enzymatic activity did not change much against the variations of pH and temperature, when bromelain was incorporated on NPs. Liposomes were more efficient in the bromelain incorporation, with an encapsulation efficiency of 71.5 ± 0.91%, also higher than the encapsulation founded by other authors. The nanovesicles size ranged from 243.2 to 298.6 nm after incorporation, and the zeta potential increased in modulus, ranging from -29.4 to -36.8 mV, indicating greater stability to aggregation after the incorporation. The histopathological study of the lesions allowed to verify the edema reduction in the animals treated with NPs-bromelain and liposomes-bromelain containing films on 14th day, absence of polymorphonuclears in the treatment with membranes containing NPs-bromelain, less intensity of the cellular infiltrate and absence of neovascularization in the treatment with liposomes-bromelain containing membranes. This study demonstrated the bromelain incorporation on nanocarriers and its application in polymer blends, with maintenance of the enzymatic activity and healing potential of the obtained products.
Wound healing films;Nanocarriers;Cutaneous wound healing;Modified drug release;Proteolytic enzymes
01
121
PORTUGUES
UNIVERSIDADE ESTADUAL DE FEIRA DE SANTANA
O trabalho possui divulgação autorizada
20. Tese - VF - Íngara Keisle São Paulo Barretto Miranda.pdf

Contexto

BIOTECNOLOGIA COM ÊNFASE EM RECURSOS NATURAIS DA REGIÃO NE
CARACTERIZAÇÃO, CONSERVAÇÃO E MANEJO SUSTENTÁVEL DE RECURSOS BIOLÓGICOS COM POTENCIAL BIOTECNOLÓGICO
Desenvolvimento de filmes curativos contendo bromelina obtida a partir de abacaxizeiros do banco ativo de germoplasma de abacaxi

Banca Examinadora

SANDRA APARECIDA DE ASSIS RODOWANSKI
DOCENTE - PERMANENTE
Não
Nome Categoria
MARCIO INOMATA CAMPOS Participante Externo
FRANCO HENRIQUE ANDRADE LEITE Docente - PERMANENTE
CINARA VASCONCELOS DA SILVA Participante Externo
GEANY PERUCH CAMILLOTO Participante Externo
VANESSA CRISTINA RESCIA Participante Externo

Vínculo

CLT
Empresa Privada
Ensino e Pesquisa
Sim
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