Objetivou-se neste trabalho avaliar o efeito de diferentes concentrações de EM e períodos de incubação na produção de substrato a base de cama de galinha para a produção de mudas de alface, e avaliar o efeito de diferentes concentrações de EM, aplicado em canteiros na forma de biofertilizante para a produção da alface. Para isto foram realizados dois experimentos. No experimento 1, foram produzidas mudas de alface. A cama de galinha utilizada no substrato para a produção das mudas recebeu solução com concentrações de 0%, 10,0% e 20,0% de EM, a trinta dias, a quinze dias e no dia da semeadura das sementes. As mudas foram produzidas em bandejas de polipropileno. O experimento ocorreu no setor de Agroecologia do IFES, Campus de Alegre. O arranjo experimental foi o Delineamento Inteiramente Casualizado (DIC), com nove tratamentos e quatro repetições. Aos 24 dias da semeadura as plantas foram coletadas para análise das variáveis. No experimento 2, houve o desenvolvimento da alface em canteiro. O arranjo experimental foi o Delineamento em Blocos Casualizados (DBC), com quatro tratamentos e três repetições. Os tratamentos diferiram entre si em função do percentual de EM contido, sendo: T1: 0,0% EM; T2: 5,0% EM; T3: 10,0 % EM e T4: 20,0% EM. O experimento foi realizado no setor de Agroecologia do Instituto Federal do Espírito Santo, Campus de Alegre. Após 46 dias do transplante das mudas para o canteiro, as amostras foram coletadas para análise das variáveis. Os resultados do experimento 1 mostraram que as plantas desenvolvidas no substrato contendo o fertilizante incubado com EM nas concentrações de 10% e 20% apresentaram rendimento inferior em relação ao fertilizante isento de EM. O resultado pode ser explicado pelo excesso de nutrientes disponibilizados pelo EM no meio. No experimento 2, os resultados obtidos mostraram que o EM aplicado como biofertilizante não influenciou no desenvolvimento da cultura, independente da sua concentração.