Lippia origanoides, arbusto aromático medicinal nativo, é utilizado popularmente em todo Brasil. Diversos estudos têm mostrado atividades bioativas para esta espécie que lhe conferem potencial terapêutico. É considerada uma fonte natural de substâncias com atividade antioxidante, a exemplo dos ácidos fenólicos e flavonoides. Este trabalho objetivou avaliar a composição química de L. origanoides, assim como as atividades fotoprotetora e espasmolítica in vitro que os extratos e frações dessa espécie apresenta. O fator de proteção solar (FPS) bem como a razão UVA/UVB e o perfil antioxidante foram identificados através da espectrofotometria em UV-Vis. A atividade espasmolítica foi avaliada através do potencial relaxante em traqueia isolada de ratos da linhagem Wistar (in vitro), sendo que a fração mais ativa foi submetida ao processo de purificação, com estruturas das substâncias puras estabelecidas através da análise por espectrometria de massas ou classificadas através da cromatografia em camada delgada. Com exceção das frações em hexano, as amostras em estudo apresentaram FPS acima do mínimo determinado pela ANVISA (FPS 6). A fração em diclorometano da folha apresentou capacidade espasmolítica promissora, com um E.máx. de 100%. A partir da fração em diclorometano foi possível isolar e identificar dois compostos: carvacrol e espatulenol. Os resultados obtidos demonstraram que a fração em diclorometano da folha se mostrou mais efetiva contra os espasmos na traqueia, enquanto que a fração em acetato de etila do caule foi aquela que apresentou melhor atividade fotoprotetora, além de possuir ação coadjuvante em filtros solares sintéticos, aumentando o valor do FPS da formulação.