A atividade catalítica das proteases microbianas faz delas uma opção de baixo custo para a hidrólise de ligações peptídicas para usos industriais, por serem de fácil produção e manipulação. Este trabalho teve por objetivo principal a produção de proteases pelos fungos Periconia byssoides, Rhodotorula oryzicola e Morella speciosa de forma a determinar suas características bioquímicas, purificação, características cinéticas de temperatura, pH, termoestabilidade, Km e Vmax e posterior imobilização. A obtenção das enzimas foi realizada por fermentação submersa. A purificação foi realizada por precipitação com etanol (70%) e cromatografia de filtração em gel em Sephacryl S-200. Foi utilizado planejamento do tipo Doehlert para determinar o pH e temperatura ótimos da enzima. Foi avaliado o efeito de diferentes sais, nas concentrações de 0,1 M e 0,01 M, na atividade das proteases. Parâmetros cinéticos da enzima foram avaliados utilizando diferentes concentrações de caseína, sendo determinado os valores de Km e Vmax. O estudo de imobilização enzimática pela técnica de adsorção testou oito suportes comerciais: sílica gel, celite 545, quitosana, MAT 540, Sigma Cpc 27709, Purolite Lifetech ECR8806F, ECR8204F e ECR1090F. Também foi testada a metodologia de encapsulamento da enzima, para verificar a sua viabilidade como imobilização e reuso. O meio contendo peptona foi o mais adequado para a produção de protease extracelular por P. byssoides e M. speciosa e meio contendo caseína para a produção por R. oryzicola. Sulfato de sódio 0,01 M aumentou a atividade catalítica da enzima em 130%. O cloreto de bário agiu como cofator das proteases produzidas por todos os micro-organismos desse estudo. O melhor suporte para a imobilização da enzima de P. byssoides e M. speciosa foi o MAT 540. Já para a protease de R. oryzicola a Celite 545 mostrou-se eficiente, aumentando a atividade da enzima e apresentando bom perfil de reutilização. Estes resultados indicam que o bioprocesso com micro-organismos do semiárido é uma possibilidade promissora na busca de novas fontes de proteases, com um forte apelo sustentável e econômico, com potencial para serem avaliadas como fontes mais eficientes e/ou econômicas.