Toxoplasma gondii, agente etiológico da toxoplasmose, é um protozoário pertencente ao filo Apicomplexa descrito pela primeira vez em 1908. Sabe-se que este parasito pode ter como hospedeiro intermediário quase todos os animais de sangue quente, incluindo os seres humanos, e estima-se que pelo menos um terço da população mundial esteja infectada por ele. Mesmo assim, os tratamentos atualmente disponíveis não são eficazes contra a forma crônica da doença e apresentam limitações devido à toxicidade e longo tempo de administração. Ainda, embora grande parte das pessoas infectadas por T. gondii seja assintomática ou manifeste sintomatologia leve e de curta duração, uma vez que o protozoário se estabelece no hospedeiro, ele se mantém latente e pode ser reativado em casos de imunossupressão, bem como a enfermidade pode se mostrar grave em casos de pacientes gestantes e tem sido amplamente relacionada a distúrbios de natureza neurológica. Dessa forma, é essencial a procura por novos fármacos que sejam eficazes na eliminação do parasito e, para que isso seja feito, a padronização de uma metodologia de testagem in vivo é indispensável. Diante de tal contexto, esse trabalho visou estabelecer um ensaio para avaliação da eficácia de compostos contra T. gondii em camundongos infectados pelo protozoário e quantificar a carga parasitária por Real-Time Quantitative Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction (RT-qPCR). Dessa maneira, foi necessário construir uma curva padrão de taquizoítas de T. gondii a partir do valor de Cycle Threshold (Ct) obtido por RT-qPCR e estabelecer um modelo experimental de toxoplasmose aguda e crônica em camundongos infectados com T. gondii. Por fim, o tratamento dos animais infectados foi feito com compostos de reposicionamento que apresentaram comprovada atividade anti-T. gondii in vitro e pirimetamina como padrão de comparação e controle positivo. Objetivou-se, portanto, quantificar a carga parasitária no tecido cerebral e no peritônio dos animais infectados através da RT-qPCR. No presente trabalho, além da padronização do ensaio em dois modelos, foram testados. Foram testados 3 compostos em modelo agudo, sendo que um deles demonstrou provável toxicidade e foi descartado da análise, e os outros dois demonstraram eficácia parcial. Já no modelo crônico, 5 compostos foram testados, sendo que 4 deles se provaram eficazes na diminuição da carga parasitária cerebral e apenas um deles apresentou provável toxicidade aguda.