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UNIVERSIDADE FEDERAL DO OESTE DO PARÁ
CIÊNCIAS DA SAÚDE (15010015073P5)
CARACTERIZAÇÃO QUÍMICA E ATIVIDADE BIOLÓGICA DE COMPOSTOS OBTIDOS DE Streptomyces sp. ISOLADO DE SOLO DE VÁRZEA NA AMAZÔNIA
AMANDA DE LIMA SILVA
DISSERTAÇÃO
02/04/2024

O uso extensivo dos antibióticos na terapia de doenças infecciosas contribuiu para o surgimento de cepas bacterianas resistentes, representando um desafio significativo para a saúde pública. A resistência a tratamentos não está limitada apenas à terapia antibiótica; o tratamento do câncer apresenta desafios semelhantes. Nesse contexto, a procura por novos agentes antimicrobianos e anticâncer provenientes de fontes naturais pode ser uma estratégia importante na descoberta de novos bioativos. Nesse estudo foram isoladas actinobactérias nativas de solo de várzea coletado na comunidade Saracura, às margens do rio Amazonas, e realizado um estudo químico a partir do extrato bruto através de análise por Cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massas CG-EM e Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) em fase reversa. A identificação dos isolados foi realizada através de caracterização morfológica, bioquímica e molecular através do sequenciamento do gene RNAr 16S. Os estudos de atividade antimicrobiana foram realizados através do teste de bloco de agar frente a 15 patógenos de interesse clínico para seleção do isolado promissor e obtenção do extrato bruto utilizando o solvente acetato de etila. O extrato bruto obtido foi utilizado para estudo da atividade antioxidante, antitumoral e investigação química. Foram obtidos 4 isolados de actinobactérias, identificadas como Streptomyces sp., renomeadas como VAR1, VAR2, VAR4 e VAR5. Foram amplificados genes biossintéticos do tipo PKS e NRPS em todos os isolados. Na avaliação de antagonismo foi verificado que todos os isolados foram ativos contra pelo menos 1 patógeno de interesse clínico, com destaque para Streptomyces sp. VAR2 que produziu um halo de inibição de crescimento de 18mm frente a Aeromonas hydrophyla, e de 16mm para Proteus vulgaris. O extrato bruto do isolado Streptomyces sp. VAR2 promoveu a inibição do crescimento celular de linhagem de carcinoma colorretal humano em 95,87% em uma concentração de 10 μg/ml. Além disso, foi verificada uma atividade de eliminação de radicais livre de DPPH de 7,90% e de ABTS de 20.75%. A análise por CG-EM do extrato bruto do isolado Streptomyces sp. VAR2 revelou a presença majoritária do composto 2-Decanol, éter metílico, ainda não reportado na literatura como bioativo, seguido pelo 2,6-dihexadecanoato de ácido l-(+)-ascórbico, composto já descrito na literatura com atividade antioxidante. Os resultados desta pesquisa indicam a capacidade dessas bactérias de produzirem compostos com variada atividade biológica, podendo indicar, no futuro, novas opções terapêuticas para problemas de saúde global emergentes como a resistência microbiana e o tratamento do câncer.

Amazônia;Streptomyces;Várzea;Antimicrobianos;Antitumorais
The extensive use of antibiotics in the therapy of infectious diseases has contributed to the emergence of resistant bacterial strains, representing a significant challenge to public health. Treatment resistance is not limited to just antibiotic therapy; cancer treatment presents similar challenges. In this context, the search for new antimicrobial and anticancer agents from natural sources can be an important strategy in the discovery of new bioactives. In this study, native actinobacteria were isolated from floodplain soil collected in the Saracura community, on the banks of the Amazon River, and a chemical study was carried out using the crude extract through analysis by Gas Chromatography coupled to Mass Spectrometry (CG-MS) and High-Performance Liquid Chromatography (HPLC) in reversed phase. The identification of the isolates was carried out through morphological, biochemical and molecular characterization through sequencing of the 16S rRNA gene. Antimicrobial activity studies were carried out using agar block testing against 15 pathogens of clinical interest to select the promising isolate and obtain the crude extract using the solvent ethyl acetate. The crude extract obtained was used to study antioxidant and antitumor activity and to a chemical investigation. 4 isolates of actinobacteria were obtained, identified as Streptomyces sp., renamed as VAR1, VAR2, VAR4 and VAR5. PKS and NRPS biosynthetic genes were amplified in all isolates. In the antagonism assessment, it was verified that all isolates were active against at least 1 pathogen of clinical interest, with emphasis on Streptomyces sp. VAR2 which produced a growth inhibition halo of 18mm against Aeromonas hydrophyla, and 16mm for Proteus vulgaris. The crude extract of the isolated Streptomyces sp. VAR2 promoted cell growth inhibition of human colorectal carcinoma lineage by 95.87% at a concentration of 10 μg/ml. Furthermore, a free radical scavenging activity of DPPH of 7.90% and ABTS of 20.75% was verified. The GC-MS analysis of the crude extract of the isolated Streptomyces sp. VAR2 revealed the majority presence of the compound 2-Decanol, methyl ether, not yet reported in the literature as bioactive, followed by l-(+)-Ascorbic acid 2,6-dihexadecanoate, a compound already described in the literature with antioxidant activity. The results of this research indicate the ability of these bacteria to produce compounds with varied biological activity, which may indicate, in the future, new therapeutic options for emerging global health problems such as microbial resistance and cancer treatment.
Amazon;Streptomyces;Floodplain;Antimicrobials;Antitumor
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PORTUGUES
UNIVERSIDADE FEDERAL DO OESTE DO PARÁ
O trabalho possui divulgação autorizada
Dissertao_Amanda_de_Lima_Silva_PPGCSA_com_ata_e_ficha_catalografica.pdf

Contexto

Ciências da Saúde
INOVAÇÃO TERAPÊUTICA PARA ATENÇÃO À SAÚDE
-

Banca Examinadora

SILVIA KATRINE SILVA ESCHER
DOCENTE - PERMANENTE
Sim
Nome Categoria
ISABELLA CRISTHINA GONCALVES COSTA Participante Externo
SILVIA KATRINE SILVA ESCHER Docente - PERMANENTE
SARA FREITAS DE SOUSA Participante Externo
SANDRA LAYSE FERREIRA SARRAZIN Docente - PERMANENTE

Vínculo

-
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Não
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