A COVID-19 é uma doença infecciosa causada pelo vírus SARS-CoV-2 com alta taxa de transmissão. Por esta razão, os testes rápidos concebidos para identificar a doença têm sido cruciais, mas as mutações do vírus têm potencialmente impactado a precisão destes testes de diagnóstico. Estudos recentes concentraram-se na identificação de epítopos imunodominantes na região RBD, peptídeos que podem identificar regiões lineares de ligação a IgG e IgA. Entre esses peptídeos, o P44 demonstrou reatividade superior e está em uma região hotspot de mutação presente em diversas variantes. Consequentemente, este peptídeo foi selecionado para a construção de biossensores baseados em SERS e técnicas eletroquímicas, permitindo detecção ultrassensível que fornece resultados rápidos, precisos e confiáveis particularmente vitais onde a identificação rápida é crítica. Nanopartículas de ouro (AuNPs) com tamanho médio de 30 nm foram sintetizadas pelo método Turkevich. Essas AuNPs foram funcionalizadas com o peptídeo P44-WT (WildType) e suas formas mutadas, P44-T (variante Gama) e P44-N (variante Beta) utilizando ácido 4-mercaptobenzóico (MBA) como agente estabilizador. A funcionalização dos AuNPs foi confirmada através de ensaios UV-Vis, que apresentaram deslocamento da banda plasmônica de 535 nm para 600 nm, e por medidas DLS, indicando aumento de aproximadamente 52 nm no raio hidrodinâmico. Isto confirma a funcionalização e o reconhecimento de anticorpos. Os espectros obtidos na análise SERS foram modelados utilizando a técnica de classificação multivariada PLS-DA que apresentou 100% de sensibilidade e 76% de especificidade para amostras (n=104). Adicionalmente, foram realizados testes eletroquímicos, replicando a plataforma SERS em eletrodos de carbono vítreo. Esses testes confirmaram a interação peptídeo-anticorpos, com limites de detecção de 0,43, 4,85 e 8,04 ng/ml para P44-WT, P44-T e P44-N. Para validar estes ensaios, foram utilizados soros de pacientes convalescentes com COVID-19 confirmados por ELISA. Os dados sugerem que as duas técnicas estão validadas para a construção de biossensores confiáveis, rápidos, porém, a escolha do peptídeo e a otimização são essenciais para a obtenção de dados confiáveis. Além disso, é possível comparar as duas técnicas, avaliando o desempenho e sugerindo a melhor opção frente a custo e complexidade no preparo de amostras, além da obtenção dos resultados. Tendo essas premissas, podemos concluir que estas metodologias podem ser aplicadas a outras doenças, seria apenas necessário realizar a identificação do peptídeo apropriado para o reconhecimento do anticorpo.