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Dados do Trabalhos de Conclusão

UNIVERSIDADE FEDERAL DO PARÁ
SAÚDE ANIMAL NA AMAZÔNIA (15001016057P4)
Identificação de Escherichia coli patogênica para aves em carne de frango
MYLLA CHRISTY DA SILVA DUFOSSE
TESE
30/09/2022

O Brasil é o país que mais exporta carne de frango e é o segundo maior produtor mundial. Visando garantir o aumento da produção, torna-se necessário o controle da sanidade avícola que acarretam risco para a saúde pública. Associados a grandes números de doenças, as cepas de Escherichia coli patogênicas aviarias (APEC) são responsáveis por muitas infecções, podendo ocasionar risco de contaminação das carcaças com o patógeno no processamento, causando preocupação aos órgãos de vigilância sanitária. Pela importância desse micro-organismo, estudos tiveram como objetivo caracterizar cepas de E. coli, além de padronizar, identificar e detectar genes de virulência de resistência sérica (iss) e hemaglutinação (tsh) através de uma multiplex PCR (Reação em Cadeia de Polimerase), aplicar o teste de susceptibilidade antimicrobiana e por fim avaliar alteração histopatológicas em carcaças de frangos de corte na região estado do Pará. No pimeiro momento, realizou-se a padronização e aplicação da técnica de multiplex PCR utilizando genes de virulencia (iss e tsh), no qual, foram coletados de forma aleatória por conveniência, 16 amostras de traqueia oriundas de frangos prontos para comercialização em feiras de 16 municípios na microrregião Bragantina-PA. No segundo momento foram coletadas 30 carcaças de aves condenadas com suspeitas de aerossaculite, em um abatedouro avícola no estado do Pará, onde foram usados fragmentos dos órgãos como traqueia, fígado e pulmão para ideitificação de cepas de E. coli, seguido, pela aplicação da técnica mPCR dos genes de virulência (iss e ths) e exame histopatológico. E por fim, foram coletadas, de forma aleatória por conveniência, 14 amostras de frango comercializadas em feiras (7 amostras) e supermercados (7 amostras) da região metropolitana de Belém, onde foram submetidas a análises microbiológicas e PCR multiplex na identificação de fatores de virulência iss e tsh, fragmentos da traqueia, pulmão e tecido muscular de cada amostra de frango. Após, a identificação das cepas de E. coli, as mesmas foram submetidas ao teste antimicrobiano, no qual foram testados contra 6 agentes antimicrobianos (amoxicilina, cefalexina, doxiciclina, enrofloxacina, penicilina e sulfametoxazol). Os resultados obtido pela técnica aplicada em todas as amostras coletadas, foi eficiente para caracterizar genotipicamente os isolados de E. coli, onde nas amostras coletadas em feiras dos municípios da microrregião Bragantina-PA, detectou-se 87,5% das amostras pelo menos um dos genes pesquisados, seguidos por avaliação separadamente, os fatores de virulência, com o resultados de diagnósticos em 6,25% das amostras apresentou o gene amplificado iss e 87,5% resultado positivo para o gene tsh, sendo que apenas uma amostra dentre as aves analisadas apresentou os genes de virulência iss e tsh simultaneamente. Já para os 30 frangos condenados, constatou com a utilização da mutiplex PCR, os genes tsh (670pb) e iss (720pb) devidamente amplificados, nos três órgãos das aves 1, 19 e 22, caracterizando uma infecção mista, assim como foram identificados 7/30 aves os dois fatores de virulência apenas nos órgãos respiratórios, o gene de virulência mais frequente foi o tsh amplificando 670pb em 7/30 aves nos órgão respiratórios, ressaltando que nos 17 fígados estudados não houve amplificação de nenhum dos fatores de virulência, certificando que as aves não apresentavam quadro de septicemia. Além disso, utilizando o diagnóstico histopatológico detectou-se a predominância de heterófilos e mononucleares na traqueia (30/30), no pulmão (27/30) e no fígado (4/30), onde praticamente não foi diagnosticada nenhuma alteração, diferentemente dos órgãos respiratórios. Já para as amostras coletadas em feiras e supermercados na região metropolitana de Belém-PA, os resultados da análise microbiológica apontaram uma prevalência total de 71,42% (10/14) de E. coli nas carcaças de frango, a prevalência para pelo menos um dos genes avaliados foi de 100%, sendo o gene iss presente em todas as amostras e o tsh em 85,7% (12/14). Dos 25 isolados de E. coli, distribuídos entre os órgãos das aves e feira e supermercado, 76% foram resistentes a enrofloxacina, 64% a doxiciclina, 60% a amoxicilina e 40% a sulfametoxazol. Conclui-se, diante dos resultados obtidos, a Multiplex PCR para os genes de virulência tsh e iss apresenta um grande potencial na caracterização de isolados de E. coli, com isso podemos propor como uma análise alternativa para prevenção e fiscalização desse agente nos frangos comercializados, atribuindo a utilização de tecnologias para identificação e prevenção de E. coli nos aviários e matadouros avícolas. Dessa maneira, ressalta a importância do consumo de carcaças de aves saudáveis e abatidas de forma higiênico-sanitária adequada.

carcaças;fatores de virulência,;diagnóstico;aerossaculite,;inspeção.
Brazil is the country that most exports chicken meat and is the second largest producer in the world. In order to guarantee the increase in production, it is necessary to control poultry health that pose a risk to public health. Associated with large numbers of diseases, avian pathogenic Escherichia coli (APEC) strains are responsible for a large number of infections, which may cause a risk of contamination of carcasses with the pathogen during processing, causing concern to health surveillance agencies. Due to the importance of this microorganism, studies aimed to characterize strains of E. coli, in addition to standardizing, identifying and detecting virulence genes of serum resistance (iss) and hemagglutination (tsh) through a multiplex PCR (Polymerase Chain Reaction). ) and finally to apply the antimicrobial susceptibility test in broiler carcasses in the state of Pará. In the first moment, the standardization and application of the multiplex PCR technique was carried out using virulence genes (iss and tsh), in which 16 samples of trachea from chickens ready for commercialization in fairs were randomly collected for convenience. 16 municipalities in the Bragantina-PA micro-region. In the second moment, 30 carcasses of birds condemned with suspicion of airsacculitis were collected in a poultry slaughterhouse in the state of Pará, where fragments of organs such as trachea, liver and lung were used to identify E. coli strains, followed by the application of mPCR technique of virulence genes (iss and ths) and histopathological examination. Finally, 14 samples of chicken sold at fairs (7 samples) and supermarkets (7 samples) in the metropolitan region of Belém were collected, randomly for convenience, where they were subjected to microbiological analysis and multiplex PCR to identify risk factors. iss and tsh virulence, trachea, lung and muscle tissue fragments from each chicken sample. After the identification of the E. coli strains, they were submitted to the antimicrobial test, in which they were tested against 6 antimicrobial agents (amoxicillin, cephalexin, doxycycline, enrofloxacin, penicillin and sulfamethoxazole). The results obtained by the technique applied to all the samples collected, was efficient to genotypically characterize the E. coli isolates, where it was found that in the samples collected at fairs in the municipalities of the Bragantina-PA microregion, 87.5% of the samples at least one of the genes researched, followed by separately evaluation, the virulence factors, with the diagnostic results in 6.25% of the samples presented the amplified gene iss and 87.5% positive result for the tsh gene, and only a sample of the analyzed birds presented the virulence genes iss and tsh simultaneously. For the 30 condemned chickens, using the PCR multiplex, the tsh (670pb) and iss (720pb) genes were duly amplified in the three organs of birds 1, 19 and 22, characterizing a mixed infection, as well as 7 /30 birds the two virulence factors only in Organs respiratory organs, the most frequent virulence gene was tsh amplifying 670bp in 7/30 birds in the respiratory organs, emphasizing that in the 17 livers studied there was no amplification of any of the virulence factors, certifying that the birds did not have septicemia. Furthermore, using the histopathological diagnosis, a predominance of heterophils and mononuclear cells was detected in the trachea (30/30), in the lung (27/30) and in the liver (4/30), where practically no alteration was diagnosed, unlike the respiratory organs. As for the samples collected at fairs and supermarkets in the metropolitan region of Belém-PA, the results of the microbiological analysis indicated a total prevalence of 71.42% (10/14) of E. coli in chicken carcasses, the prevalence for at least one of the genes evaluated was 100%, the iss gene being present in all samples and tsh in 85.7% (12/14). Of the 25 E. coli isolates, distributed between the organs of the birds and the fair and supermarket, 76% were resistant to enrofloxacin, 64% to doxycycline, 60% to amoxicillin and 40% to sulfamethoxazole. It is concluded, given the results obtained, the Multiplex PCR for the virulence genes tsh and iss has great potential in the characterization of E. coli isolates, with this we can propose as an alternative analysis for the prevention and surveillance of this agent in commercialized chickens, attributing the use of technologies for the identification and prevention of E. coli in aviaries and poultry slaughterhouses. In this way, it emphasizes the importance of consuming healthy and slaughtered poultry carcasses in an adequate hygienic-sanitary way
carcasses,;virulence factors,;diagnosis,;aerosaculitis,;fairs.
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PORTUGUES
UNIVERSIDADE FEDERAL DO PARÁ
O trabalho não possui divulgação autorizada

Contexto

SÁUDE ANIMAL
SAÚDE PÚBLICA E SEGURANÇA ALIMENTAR
Utilização de diferentes métodos para autenticação de produtos de origem animal comercializados nas regiões Norte e Nordeste do Brasil

Banca Examinadora

TALITA BANDEIRA ROOS
DOCENTE - PERMANENTE
Sim
Nome Categoria
TALITA BANDEIRA ROOS Docente - PERMANENTE
CARINA MARTINS DE MORAES Docente - PERMANENTE
GABRIELLE VIRGINIA FERREIRA CARDOSO Egresso - Doutorado
LUCIANA FARIAS DA COSTA DE AVILA Participante Externo
GABRIELA RIET CORREA RIVERO Docente - PERMANENTE

Financiadores

Financiador - Programa Fomento Número de Meses
FUND COORD DE APERFEICOAMENTO DE PESSOAL DE NIVEL SUP - Programa de Demanda Social 36

Vínculo

CLT
Instituição de Ensino e Pesquisa
Ensino e Pesquisa
Sim
Plataforma Sucupira
Capes UFRN RNP
  • Compatibilidade
  • . . .
  • Versão do sistema: 3.86.1
  • Copyright 2022 Capes. Todos os direitos reservados.

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